N-羥基琥珀酰亞胺，俗稱NHS，是一種羥基化琥珀酰亞胺，廣泛用于羧酸活化為NHS酯，以促進與親核試劑的偶聯。這種方法常用于激活熒光團的游離酸形式，以促進這些熒光團與蛋白質胺殘基的結合。NHS酯活化在N-酰基氨基酸的合成中也有描述。在碳二亞胺法中用于改進酰胺化和肽偶聯。

N-羥基琥珀酰亞胺可以在存在二環己基碳二亞胺的條件下在羧酸中通過脫水反應合成N-羥基琥珀酰亞胺酯。 N-羥基琥珀酰亞胺已用于中間介質的合成，它還用于微流體整合的表面等離子體共振（SPR）平臺的微通道的表面修飾的實驗方法中，用于對細菌病原體進行檢測和定量。碳二亞胺方法中使用的添加劑用于改良的酰胺化及肽偶聯。