Seebio? T7 RNA Polymerase
- 別名:T7 RNA聚合酶
- 編碼:EAE0006C
- 級別:
- 簡介:本產品是重組型噬菌體T7 RNA聚合酶,來源于大腸桿菌。T7 RNA聚合酶能夠識別T7啟動子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’),以雙鏈或單鏈DNA為模板,以NTP為底物,催化 5’→3’ 的RNA合成。線性質粒、PCR產物均可用作體外合成RNA的模板。
基礎信息
中文名稱 | Seebio? T7 RNA 聚合酶 |
酶活定義 | 在 37℃、pH8.0的條件下,1 h內使1nmol的AMP摻入多核苷酸所需要的酶量定義為1個活性單位。 |
產品介紹
本產品是重組型噬菌體T7 RNA聚合酶,來源于大腸桿菌。T7 RNA聚合酶能夠識別T7啟動子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’),以雙鏈或單鏈DNA為模板,以NTP為底物,催化 5’→3’ 的RNA合成。線性質粒、PCR產物均可用作體外合成RNA的模板。
注:G*為 RNA 轉錄的首位堿基。
【產品特點和優勢】
(1)5’→3’ RNA聚合酶活性
(2)可用于標記或非標記RNA的合成
(3)可接受生物素、地高辛、熒光蛋白標記的核苷酸作為底物用于RNA的合成
【成分】
T7 RNA polymerase (50 U/μL)
5×Transcription Buffer 1ml
【儲存緩沖液】
50mM Tris-HCl (pH 7.9),100mM NaCl,10mM DTT,1mM EDTA,0.1% (v/v) Triton X-100和 50% (v/v) 甘油。
【5×反應緩沖液】
200mM Tris-HCl (pH 7.9,25℃),30mM MgCl2, 50mM DTT,50mM NaCl和10mM亞精胺。
【使用建議】
1、溶解在DEPC水(AAA0014B)中的線性DNA作為模板。
2、如下配置反應混合液:
組份 | 終濃度 |
5×反應液 | 1× |
10mM NTP | 2mM |
DNA模板 | 1μg/50μl |
RNA抑制劑 | 50U/50μl |
T7 RNA聚合酶 | 30U/50μl |
DEPC水 | 至50μl |
3、37℃撫育2h。
4、去除模板DNA,純化獲得轉錄出的RNA。
【注意事項】
1、操作及轉錄反應應在RNase-free環境下進行,建議戴手套,反應體系內加入RNase抑制劑等防止RNA被降解。
2、 當轉錄長度< 100nt時,模板量可增加至2μg。
3、為避免低溫條件下DNA和亞精胺結合形成沉淀,反應混合物應在室溫下制備。
4、反應混合物可按比例放大或縮小。
【運輸、儲存條件和有效期】
干冰運輸。-20℃保存,有效期兩年。
質量指標
Purity(SDS-PAGE) | ≥90% |
Endonuclease Activity(Nicking) | Not detected |
Exonuclease Activity | Not detected |
Non-Specific DNase Activity | Not detected |
Promoter Specificity | Not detected |
RNase Activity | Not detected |
Appearance | Liquid |
MSDS
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