Seebio? 辣根過氧化物酶（HRP）
- 別名：Horseradish Peroxidase；9003-99-0
- 編碼：ECE0066U
- 級別：
- 簡介：辣根過氧化物酶（HRP）分離自辣根中， 它可用于生物化學應用，如蛋白質印跡、ELISA和免疫組織化學。 辣根過氧化物酶可用于擴增弱信號并增加靶分子（例如蛋白質）的可檢測性。
基礎信息
| 中文名 | Seebio? 辣根過氧化物酶（HRP） |
| 英文名 | Horseradish Peroxidase |
| Mol.Weight | 44kDa |
產品介紹
【產品基本信息和用途】
辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一種糖蛋白，從辣根（Horseradish）中提取。HRP分子量為44,000，等電點為pI 3～9，是一個球狀分子，被血紅素鐵分成遠端區和近端區。血紅素鐵與HRP共價連接。HRP的純度通常可通過A403與A280的比值（RZ值）來檢測。然而，不同的同工酶在相同純度下會有不同的RZ值。適合HRP酶催化的pH值因供氫體不同而稍有差異，但多在pH 5左右。已知疊氮化鈉，氰化物，L-胱氨酸，重鉻酸鹽，亞乙基硫脲，羥基胺，硫化物，釩酸，對氨基苯甲酸等能夠抑制HRP活性，Cd2+，Co2+，Cu2+，Fe3+，Mn2+，Ni2+和Pb2+離子具有酶活抑制作用。HRP在組織化學染色和診斷分析中被廣泛用作報告酶。在有機合成中，HRP被用于聚合反應、氧化脫氫反應和磺化氧化反應。HRP還被用作電化學生物傳感器，在生物修復系統中用于降解合成染料等。
【應用舉例】
高碘酸鹽法抗體交聯
1、將HRP溶解于含有8mM高碘酸鈉的0.1M碳酸鈉中，濃度為1mg/mL；
2、室溫放置2小時，使HRP被充分氧化；
3、按HRP:IgG=1:7(mg/mg)的比例加入過量的IgG，然后加入HRP和IgG總質量1/6的干燥Sephadex，以破壞未反應的高碘酸鹽；
4、室溫孵育3小時；
5、過濾去除Sephadex，保留溶液；
6、加入l/20 體積的新鮮硼氫化鈉溶液（5 mg/ml，溶解在0.1 mM氫氧化鈉中），半小時后重復加入3/20 體積的新鮮硼氫化鈉溶液，保持1小時。
7、用50%硫酸銨沉淀HRP-IgG偶聯物，未交聯的自由IgG用Con A親和層析（PBS-NaC1平衡）去除，結合在柱上的HRP-IgG用0.01 M α-甲基D-吡喃甘露糖苷洗脫。
參考文獻：1. Anal Biochem. 1984 Feb;136(2):451-7;
參考文獻：2. Arch Virol. 1982;74(4):277-91.
【酶活定義】
在25 ℃，pH7.0時，每分鐘催化轉化一個微摩爾過氧化氫的酶量。
【產品組分】
凍干粉，無添加成分。
【質量指標】
項目 | 指標 |
來源 | 辣根 |
分子量 | 44kDa |
活性 | ≥250U/mg |
RZ值 | 2.5-4.0 |
外觀 | 褐色結晶性凍干粉狀 |
【運輸、儲存條件和有效期】
低溫運輸，2-8℃保存，有效期≥1年。
【注意事項】
1、本產品限科學研究使用。
2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
【產品基本信息和用途】
辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一種糖蛋白，從辣根（Horseradish）中提取。HRP分子量為44,000，等電點為pI 3～9，是一個球狀分子，被血紅素鐵分成遠端區和近端區。血紅素鐵與HRP共價連接。HRP的純度通常可通過A403與A280的比值（RZ值）來檢測。然而，不同的同工酶在相同純度下會有不同的RZ值。適合HRP酶催化的pH值因供氫體不同而稍有差異，但多在pH 5左右。已知疊氮化鈉，氰化物，L-胱氨酸，重鉻酸鹽，亞乙基硫脲，羥基胺，硫化物，釩酸，對氨基苯甲酸等能夠抑制HRP活性，Cd2+，Co2+，Cu2+，Fe3+，Mn2+，Ni2+和Pb2+離子具有酶活抑制作用。HRP在組織化學染色和診斷分析中被廣泛用作報告酶。在有機合成中，HRP被用于聚合反應、氧化脫氫反應和磺化氧化反應。HRP還被用作電化學生物傳感器，在生物修復系統中用于降解合成染料等。
【應用舉例】
高碘酸鹽法抗體交聯
1、將HRP溶解于含有8mM高碘酸鈉的0.1M碳酸鈉中，濃度為1mg/mL；
2、室溫放置2小時，使HRP被充分氧化；
3、按HRP:IgG=1:7(mg/mg)的比例加入過量的IgG，然后加入HRP和IgG總質量1/6的干燥Sephadex，以破壞未反應的高碘酸鹽；
4、室溫孵育3小時；
5、過濾去除Sephadex，保留溶液；
6、加入l/20 體積的新鮮硼氫化鈉溶液（5 mg/ml，溶解在0.1 mM氫氧化鈉中），半小時后重復加入3/20 體積的新鮮硼氫化鈉溶液，保持1小時。
7、用50%硫酸銨沉淀HRP-IgG偶聯物，未交聯的自由IgG用Con A親和層析（PBS-NaC1平衡）去除，結合在柱上的HRP-IgG用0.01 M &α-甲基D-吡喃甘露糖苷洗脫。
參考文獻：1. Anal Biochem. 1984 Feb;136(2):451-7;
參考文獻：2. Arch Virol. 1982;74(4):277-91.
【酶活定義】
在25 ℃，pH7.0時，每分鐘催化轉化一個微摩爾過氧化氫的酶量。
【產品組分】
凍干粉，無添加成分。
【質量指標】
項目 | 指標 |
來源 | 辣根 |
分子量 | 44kDa |
活性 | ≥250U/mg |
RZ值 | 2.5-4.0 |
外觀 | 褐色結晶性凍干粉狀 |
【運輸、儲存條件和有效期】
低溫運輸，2-8℃保存，有效期≥1年。
【注意事項】
1、本產品限科學研究使用。
2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
質量指標
| Purity（SDS-PAGE） | ≥90% |
| Activity（Guaiacol method） | ≥250U/mg |
| RZ （The RZ is defined as the ratio of the absorbance at 403 nm to the absorbance at 275 nm. This value is an expression of the ratio of hemin to protein content. ） | 2.5 - 4.0 |
| Appearance | Freeze-dried powder |
MSDS
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