丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK），別名丙酮酸磷轉稱酶、磷酸丙酮酸激酶，其分子質量為：228kDa。在糖酵解系統里，它是催化形成第二個ATP反應的酶。能以磷酸烯醇（phosphoenolpyruv- ate）丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7．5kcal。除需要二價金屬離子外（Mg2+和Mn2+）外，還需要一價金屬離子（K+．Rb+，Cs+），在生理上起作用的大概是K+。分子量約25萬。是催化ADP為ATP的形成，結果是形成丙酮酸的終產物。

丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變為ATP和丙酮酸，是糖酵解過程中的主要限速酶之一，有M型和L型兩種同工酶，M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織；M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后，PK釋放入血，PK的測定可用于診斷心肌梗死。

血清(28.3±12.8)U/L(丙酮酸激酶法)。