重組糖苷內切酶 H(Endo H)
- 別名:糖苷內切酶H
- 編碼:DCE0447C
- 級別:
- 簡介:糖苷內切酶H(Endo H)是一種重組糖苷酶,本產品來源于Streptomyces plicatus,采用大腸桿菌重組表達,無額外的內切和外切糖苷酶活性,可用于抗體或者其它糖蛋白的脫糖。與PNGase F(肽-N-糖苷酶F)不同,它切割所有的天冬酰胺連接的寡糖。
基礎信息
來源 | Streptomyces plicatus |
儲存液 | 20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,5mM EDTA,pH 7.5 |
活性 | >150U/ul |
應用 | 抗體及其相關蛋白去糖基化 |
產品介紹
產品描述
糖苷內切酶H(Endo H)是一種重組糖苷酶,能夠對N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的核心殼二糖核心進行切割,而不切割復雜多糖。酶切反應切割寡糖二乙酰殼二糖核心的兩個N-乙酰基葡糖胺殘基,切割后保留天冬酰胺的一個N-乙酰葡糖胺殘基。該特性與PNGase F(肽-N-糖苷酶F)不同,它切割所有的天冬酰胺連接的寡糖。本產品來源于Streptomyces plicatus,采用大腸桿菌重組表達,無額外的內切和外切糖苷酶活性,可用于抗體或者其它糖蛋白的脫糖。
酶活定義:37℃,60 min從10ug變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量定義為1U。
儲存液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,5mM EDTA,pH 7.5。
產品組分
重組Endo H | 3KU | 15KU |
10×Endo H反應緩沖液 | 500ul | 500ul |
10×糖蛋白變性緩沖液 | 500ul | 500ul |
儲存:本品應儲存于-20℃及以下,可保存至少12個月。
運輸:干冰運輸,活性穩定。
產品應用
抗體或者其它糖蛋白的N-連接高甘露糖的去除。
使用方法(僅供參考)
用去離子水溶解1-10ug糖蛋白,加入1ul 10×糖蛋白變性緩沖液,并用去離子水定溶至10ul;
100℃孵育10 min
配制以下反應體系
成分 | 用量 |
變性糖蛋白 | 10ul |
10×Endo H反應緩沖液 | 2ul |
重組Endo H | 2-4ul |
水 | 補足20ul |
37℃孵育60分鐘,反應完成后進行SDS-PAGE或HPLC分析酶切結果
注意事項
本品收到后盡量避免反復凍融;
使用時請穿實驗服并佩戴一次性手套;
本品不得直接用于臨床診斷和治療。
質量指標
MSDS
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